切片的清洗:顯微鏡標本切片的清潔將直接影響到制片質量,所以制作顯微鏡生物切片的一步是要對載玻片和蓋玻片進行清潔處理。
新購買的玻片不能直接使用,要先浸泡于95%酒精中,以去除表面的附著物質,臨用前取出,晾干或烘干備用。
使用過的舊玻片,先用肥皂水或洗衣粉水煮沸0.5h,冷卻后用軟毛刷刷掉臟物,用流水沖洗干凈后,置于95%酒精中備用。如果是石蠟切片可先放于二甲苯中浸泡數小時,把封片用的樹膠溶解掉,將蓋玻片和載玻片分開后,再用肥皂水煮沸。
對于很臟的舊玻片可先用洗液浸泡24h,取出用自來水沖洗干凈后,置于95%酒精中備用。
涂片的制作:取材要快速,避免發生細胞自溶現象;操作要輕巧,防止損傷細胞結構。
制作顯微鏡生物切片時記得涂片要均勻,厚薄要適度,太厚細胞堆疊,太薄細胞過少,都會影響觀察。操作時以在載玻片上涂上淡淡的一層樣品為宜。如果樣品細胞密度過大,如精液過濃可用生理鹽水稀釋后再做涂片。
裝片的制作
在觀察動物組織細胞的臨時裝片時,為保持細胞的正常形態,應根據動物種類的不同使用相應的生理鹽水。如哺乳類等溫血動物用0.9%生理鹽水,兩棲類等冷血動物用0.65—0.7%生理鹽水,無脊椎動物用0.45%生理鹽水,海產無脊椎動物可用過濾海水。